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GFP和YFP荧光蛋白激发光源可以共用么?

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Update time : 2024-10-26

GFP(绿色荧光蛋白)和YFP(黄色荧光蛋白)可不可以共用一款荧光蛋白激发光源,首先这得看GFP和YFP的***佳激发波长是否一样,另外得看激光光源本身是不是具备多种波段。

GFP和YFP激发波长

绿色荧光蛋白 (GFP) 是一种 β-桶状蛋白 ,由 238 个氨基酸组成,分子量约为 27 kDa。GFP 是从水晶水母 Aequorea victoria  分离而来。GFP 可通过能量转移,将水母发光蛋白通过化学作用发出的蓝色荧光转变为绿色荧光。GFP 的激发波长为 488 nm,并在约 507 nm 处有一个发射峰。同时,对 GFP 的高分辨率晶体结构研究,使得科学家们能操纵其蛋白结构,改造出在不同波长发射的颜色变体。

从下面GFP激发和发射波长图可得知,GFP的激发波长为300-510nm,主峰在488nm

GFP-1.png

增强型黄色荧光蛋白(EYFP)是黄色荧光蛋白突变体,有四个氨基酸发生突变,使得EYFP的发射光变为黄绿色,且荧光强度与EGFP荧光强度相似。mCitrine和mVenus在EYFP基础上改进的黄色荧光变体应用较为广泛。另外,还有一种经合成的DNA重排获得的能量转移黄色荧光蛋白YPet,亮度在黄色荧光蛋白中是***强的,且光稳定性较强。同时,YPet比mVenus或者其他荧光蛋白对于酸性环境的耐受能力更强。

从下面YFP激发和发射波长图可得知:

YFP的激发波长为300-520nm,主峰在505nm

yfp-1.png

由上可知,GFP和YFP的激发波长有重叠,YFP在GFP激发主峰488nm也能吸收足够的能量被激发,所以可以共用488nm激发波段的激发光源。但是从严格上来说,505nm才是YFP的激发主峰,激发效果比较好,所以一般不建议用488nm激发光源去激发YFP,如果YFP表达量不是很高的话,观察效果会很不理想。同理,对于其他的荧光蛋白也是一样的。

路阳仪器上海公司生产的激发光源有单波段,也有多波段。如果使用的488nm的单波段激发光源,则GFP和YFP不能共用激发光源;如果使用的是488nm和505nm双波段激发光源,则可共用激发光源。路阳仪器自主研发多种应该蛋白激发光源,可根据客户要求定制激发光源。产品介绍请浏览:GFP激发光源

路阳仪器的激发光源已经有数千台服务在世界各地生命科学科研实验室,每年文献数百篇。目前公司提供样机供终端用户免费试用。具体请按照网页底部联系方式联系销售人员。


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