激发光源用于植物遗传转化研究

中国科学院华南植物园农业生物技术研究中心在线发表《A simple and efficient in planta transformation method based on the active regeneration capacity of plants》，文献中使用了LUYOR-3415RG便携式双波长荧光蛋白激发光源用于绿色荧光蛋白GFP的表达。

植物遗传转化技术是植物基因工程和现代农业分子育种的必要工具。然而，现有的植物遗传转化方案复杂且效率较低，制约了多数资源植物或农作物的遗传改造，已成为植物资源开发和利用的技术障碍。因此，开发高效且多应用的植物遗传转化技术已成为植物或农业科研领域的重要研究方向。研究人员经过多年探索和研究，成功建立了一种以植物主动再生能力为基础的新型植物遗传转化方法（Regenerative  Activity-dependent  in  Planta  Injection  Delivery，RAPID）。该研究利用强再生能力植物甘薯，进行多种递送方式测试，发现通过甘薯茎段注射递送方法能快速获得阳性器官和转化个体，同时在农杆菌菌种、侵染浓度、化学活性剂等方法条件上对转化效率进行优化提升，并完成了多种报告基因和遗传编辑工具的应用，随后通过遗传学和细胞学分析方法确认了植物分生组织高效转染以及新生转化器官个体的快速再生，是迅速高效地获得稳定转基因植株的根本原因。目前，RAPID方法已成功应用于甘薯、马铃薯、厚藤等无性繁殖的经济作物或资源植物。

与传统遗传转化方法相比，RAPID方法具有较高的转化效率（提高20至100倍），操作流程更为简便（缩短2至3倍），且无需昂贵且复杂的组织培养过程。RAPID方法克服了传统方法在快速遗传转化方面的局限性，打破了各类资源植物开发和利用的瓶颈。基于植物主动再生能力及无性繁殖的特点，此方法有望应用于更广泛的植物物种，实现更多特色资源植物和经济作物的性状改良与种质创新，以推动相关领域的基础研究和应用研究发展，为特色植物的高效遗传改良和现代农业育种应用提供理论和方法支撑。

文献摘要：

Fluorescence detection

Fluorescence of the mScarlet reporter in live transgenic tissues was observed under a fluorescence stereo microscope (M205 FA, Leica, Germany) with a red fluorescence filter (Exc 540–580 nm, Em 593–667 nm). The spontaneous fluorescence spectra of sweet potato were observed under a confocal microscope (SP8 STED 3X, Leica, Germany). One-week-old adventitious roots were freshly selected for testing of root samples, and the third mature leaf of nascent shoots was selected for testing of leaf samples. Transgenic sweet potato materials containing the GFP reporter were observed using a dual-wavelength fluorescent protein excitation light source (Exc 440 nm, Em 500 nm, 3415RG, LUYOR, China). The regions near the phloem at the base of the stems were peeled to reduce epidermal autofluorescence, and the whole plant was irradiated with a light source under dark conditions. Green fluorescence was detected in the inner regions of the stems of positively transformed plants.

文献链接：https://doi.org/10.1016/j.xplc.2024.100822 

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